SPEKTROFOTOMETER

Spektrofotometer sesuai dengan namanya adalah alat yang terdiri dari spectrometer dan fotometer. Spektrometer menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang di transmisikan atau yang di absorpsi.

Filter Sinar

λ (nm)  <400400-450450-500500-570570-590590-620620-750>750

warnaUVViolet Biru Hijau Kuning Jingga MerahInfra Merah

Penyerapan sinar uv dan sinar tampak o/ molekul, melalui 3 proses yaitu :

1.Penyerapan o/ transisi electron ikatan dan electron anti ikatan.

2.Penyerapan o/ transisi electron d dan f dari molekul kompleks

3.Penyerapan o/ perpindahan muatan.

Interaksi antara energy cahaya dan molekul dapat digambarkan sbb :

E = hv

Dimana , E = energy (joule/second)

h = tetapan plank

v = frekuensi foton

Penyerapan sinar uv-vis dibatasi pd sejumlah gugus fungsional/gugus kromofor (gugus dengan ikatan tidak jenuh) yang mengandung electron valensi dengan tingkat eksitasi yang rendah. Dengan melibatkan 3 jenis electron yaitu : sigma, phi dan non bonding electron. Kromofor-kromofor organic seperti karbonil, alken, azo, nitrat dan karboksil mampu menyerap sinar ultraviolet dan sinar tampak. Panjang gelombang maksimalnya dapat berubah sesuai dengan pelarut yang digunakan. Auksokromadalah gugus fungsional yang mempunyai elekron bebas, seperti hidroksil, metoksi dan amina. Terikatnya gugus auksokrom pada gugus kromofor akan mengakibatkan pergeseran pita absorpsi menuju ke panjang gelombang yang lebih besar (bathokromik) yang disertai dengan peningkatan intensitas (hyperkromik).

Komponen dari suatu spektrofotometer berkas tunggal :

1.Suatu sumber energy cahaya yang berkesinambungan yang meliputi daerah spectrum dimana instrument itu dirancang untuk beroperasi.

2.Suatu monokromator, yakni suatu piranti untuk mengecilkan pita sempitpanjang-panjang gelombang dari spectrum lebar yang dipancarkan oleh sumber cahaya.

3.Suatu wadah sampel (kuvet)

4.Suatu detector, yang berupa transduser yang mengubah energy cahaya menjadi suatu isyarat listrik.

5.Suatu pengganda (amplifier), dan rangkaian yang berkaitan membuat isyarat listrik itu memadai untuk di baca.

6.Suatu system baca (piranti pembaca) yang memperagakan besarnya isyarat listrik, menyatakan dalam bentuk% Transmitan (% T)maupun Adsorbansi (A).

Skema spektrofotometer ;

Sumber Cahaya..Monokromator….Sampel…Detektor….Amplifier..Piranti Pembaca/Penunjuk

Beberapa jenis spektrofotometer :

1.Spektrofotometer UV-Vis

2.Spektrofotometer Infra merah

3.Spektrofotometer Serapan Atom (SSA)

4.Spektrofotometer Resonansi Magnetik (NMR)

5.SpektrofotometerPendarMolecular (pendar fluor/pendar fosfor)

6.Spektrofotometer dengan metode hamburan cahaya ( nefelometer, turbidimeter dan spektrofotometerRaman)

Hubungan antara warna dengan panjang gelombang sinar tampak.:

Panjang gelombang warna yang diserap warna komplementer

400-435 nmungu (lembayung)hijau kekuningan

450-480 nmbiru kuning

480-490 nmbiru kehijauanorange

490-500 nmhijau kebiruanmerah

500-560 nmhijaumerah anggur

560-580 nmhijau kekuninganungu (lembayung)

580-595 nmkuningbiru

595-610 nmorangebiru kekuningan

610-750 nmmerahhijau kebiruan

Pergeseran-pergeseran :

1.Bathokromik, pergeseran ke panjang gelombang yang lebih tinggi dengan energy yang lebih rendah.

2.Hypsokromik(pergeseran biru), pergeseran ke panjang gelombang yang lebih pendek.

3.Hyperkromik, peningkatan absoritivitas molar.

4.Hypokromik, reduksi absortivitas molar.

Penerapan spektrofotometrik

Hukum Beer : Absorbans, log (Po/P), radiasi monokromatik berbanding lurus dengan konsentrasi sutu spesies penyerap dalam larutan.

Hukum Bouguer (Lambert) : Bayangkan suatu medium penyerap yang homogen dalam lapisan-lapisan yang sama tebal. Tiap lapisan menyerap radiasi monokromatik yang memasuki lapisan itu dalam fraksi yang sama seperti lapisan-lapisan lain. Dengan semuanya yang lain sama, maka absorbans itu berbanding lurus dengan panjang jalan yang melewati medium.

Gabungan Hukum Bouguer-Beer, sering di tuliskan sebagaiA = abcatau A = εbc

Dengan A = absorbans

ε = absorpsivitas molar (jika konsentrasi dalam molar) dengan satuan M^-1cm^-1

a = absorpsivitas (jika konsentrasi dalam %b/v) dituliskanE^1%_1cm

b = panjang jalan/kuvet

c= konsentrasi ( dalam molar atau %b/v)

Spektra absorpsi sering diyatakan dalam %Tmaupun dalam bentuk A (absorbansi)

Maka,A = – log (%T)

A = log (P_o/P), P_o adalah daya cahaya masuk dan P adalah daya yang diteruskan melewati sampel.

Beberapa Istilah Dalam Spektrofotometri

Absorbans (A) , A = log (P_o/P)

Absorptivitas (a), tetapan dalam Hukum Bouguer-Beer bila konsentrasi dinyatakan dalam %b/v dan tebal kuvet dalam cm. Dengan satuan liter per gram per sentimeter.

Absorptivitas molar (ε), tetapan dalam Hukum Bouguer-Beer bila konsentrasi dinyatakan dalam molar dan tebal kuvet dalam cm. Dengan satuan liter per mol per sentimeter.

Transmitan (T), fraksi dari daya radiasi yang diteruskan oleh suatu sampel T = P/P_o. Sering dinyatakan sebagai suatu persentase :%T = (P/P_o) x 100%.

Referensi

Untuk lebih memahami mengenai spektrofotometer silahkan membaca buku-buku berikut :

1.Analisis Kimia Kuantitatif (terjemahan dalam Bahasa Indonesia)

R. A. Day, Jr & A. L. Underwood

Penerbit : Erlangga, Jakarta (1989)

2.Konsep Dasar Kimia Analitik (terjemahan dalam Bahasa Indonesia)

S. M. Khopkar

Penerbit : UI-Press, Jakarta (2003)

3.Kimia Farmasi Analisis

Prof. Dr. Ibnu Gholib Gandjar, DEA., Apt.

Abdul Rohman, M.Si., Apt.

Penerbit : Pustaka Pelajar, Yogyakarta (2007)